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近年来,细胞外囊泡(EVs)因其在生物医学研究中的重要作用而备受关注,他们不仅在细胞间通讯中发挥关键作用,还在疾病的早期诊断和治疗中展现了巨大潜力。然而,如何有效且高质量地分离这些囊泡仍是一个挑战。最近的一项研究中,研究人员通过基于电阻脉冲传感(RPS)技术的NanoCoulter颗粒分析仪,对五种常用的细胞外囊泡分离方法进行质量和效率的综合评估
EVs是指从细胞中释放的纳米级囊泡,广泛存在于血液、尿液、唾液等体液中。这些囊泡富含包含功能蛋白、小分子、核酸和其他代谢物。EVs几乎存在于所有类型的细胞和体液✅中,包括血浆、尿液、唾液和母乳。EVs所携带的蛋白质、脂质和miRNA的种类和含量可以直接反映其来源的类型。EVs的研究有助于更好地理解细胞生理学和病理学,在临床上EV不仅在疾病诊断方面展示出巨大的潜力,还可能成为药物递送的新工具。因此,满足特定实验需求的高纯度EV的分离和表征方法,变得尤为重要。
传统差速超速离心法(UC):转速在30000 r/min以上的称为超速离心。在超速离心基础上采用逐渐提高离心速度的方法分离不同大小的样本,可以有效分离出高纯度的EV,常被认为是纳米颗粒提取“金标准”。
颗粒表征方法。通过测量通过微小纳米孔的电流变化来评估细胞外囊泡的大小和浓度及zeta电位。这种方法具有准确、快速、简便和高㊣灵敏㊣度的优势,使其成为评估囊泡分离方法质量的理想工具。
通过RPS技术,研究人员详细分析了各分离方法的粒径分布、颗粒浓度及纯度。结果表明,虽然使用超滤法、qEV柱层析法和ExoQuick方法可以获得较高的颗粒浓度,但传统差速超速离心法在纯度上表现最佳。
粒径分布:UC5种常见的层析方法、UF、exoEasy、qEV分离出的EV粒径较为一致,约为71 nm左✅右,而ExoQuick分离的㊣EV粒径稍大,平均为77 nm。
颗粒浓度:超滤法(UC)展示了最高的颗粒浓度,达到了2.10×1012/mL,而UC法的颗粒浓度相对较低,为7.33×1010/m㊣L。
每种分离方法都有其独特的优势。据研究结果显示,超速离心法虽然操作复杂且时间较长,但当实验需求更高纯度的EVs时,超离法依旧是首选;然而,对于追求高效率和大规模生产的应用场景,超滤法和qEV柱层析法则提供了更快的分离速度和更高的颗粒浓度。
想象一下,在复杂的生物流体中,每一个通过纳米孔的微小EVs都逃不过它的“全面体检”。打破了传统光学方法中大颗粒信号屏蔽小颗✅粒从而结果失真的现象。尤其对于EVs这类多分散生物流体样本,无论✅是尺寸、浓度还是zeta电位mrna疫苗技术平台,每一个数据都✅源自对单个颗粒的直接测量,确保结果的真实可靠。这种前所未有的精准度,可以让细胞囊泡的研究迈上一级新的台阶!
准确的粒径分布分析帮助我们了解EVs样本真实的大小分布情况,颗粒浓度则反映了EVs的丰度和分离质✅量,而zeta电位则与EVs的稳定性及工程化EV的递药靶向性密切相关。这些数据为我们㊣提供了EVs的全方位信息,为纳米药物科学研究和临床应用提供了坚实的数据㊣支持。
它能够准确表征低折射率、高离子浓度或低㊣流动性液体中的纳米颗粒,确保即使在复杂生物体液中也能获得㊣可靠的结果,专业适合生物医药领域的研究。
每一张纳米孔芯片在生产时即经过了严格的定标与验证,在用户端无需消耗标准品。这使得研究人员能够更快地获得结果,加速科学发现的步伐。
在生物医药、材料科学、环境监测等多个领㊣域,它都展现出了巨大的潜力㊣和价值。凭借其高精度、高稳定性✅和广泛的应用性,NanoCoulter正逐步成为科研人员手中不可或缺的得力助手。